NR3C1 polymorphisms in Brazilians of Caucasian, African, and Asian ancestry: glucocorticoid sensitivity and genotype association / Polimorfismos NR3C1 em brasileiros de ascendência caucasiana, africana e asiática: sensibilidade aos glicocorticoides e associação de genótipos

Objective : The Brazilian population has heterogeneous ethnicity. No previous study evaluated NR3C1 polymorphisms in a Brazilian healthy population. Materials and methods : We assessed NR3C1 polymorphisms in Brazilians of Caucasian, African and Asian ancestry (n = 380). In a subgroup (n = 40), we compared the genotypes to glucocorticoid (GC) sensitivity, which was previously evaluated by plasma (PF) and salivary (SF) cortisol after dexamethasone (DEX) suppression tests, GC receptor binding affinity (K d ), and DEX-50% inhibition (IC 50 ) of concanavalin-A-stimulated mononuclear cell proliferation. p.N363S (rs6195), p.ER22/23EK (rs6189-6190), and BclI (rs41423247) allelic discrimination was performed by Real-Time PCR (Polymerase Chain Reaction). Exons 3 to 9 and exon/intron boundaries were amplified by PCR and sequenced. Results : Genotypic frequencies (%) were: rs6195 (n = 380; AA:96.6/AG:3.14/GG:0.26), rs6189-6190 (n = 264; GG:99.6/GA:0.4), rs41423247 (n = 264; CC:57.9/CG:34.1/GG:8.0), rs6188 (n = 155; GG:69.6/GT:25.7/TT:4.7), rs258751 (n = 150; CC:88.0/CT:10.7/TT:1.3), rs6196 (n = 176; TT:77.2/TC:20.4/CC:2.4), rs67300719 (n = 137; CC:99.3/CT:0.7), and rs72542757 (n = 137; CC:99.3/CG:0.7). The rs67300719 and rs72542757 were found only in Asian descendants, in whom p.N363S and p.ER22/23EK were absent. The p.ER22/23EK was observed exclusively in Caucasian descendants. Hardy-Weinberg equilibrium was observed, except in the Asian for rs6188 and rs258751, and in the African for p.N363S. The K d , IC 50 , baseline and after DEX PF or SF did not differ between genotype groups. However, the mean DEX dose that suppressed PF or SF differed among the BclI genotypes (P = 0.03). DEX dose was higher in GG- (0.7 ± 0.2 mg) compared to GC- (0.47 ± 0.2 mg) and CC-carriers (0.47 ± 0.1 mg). Conclusion : The genotypic frequencies of NR3C1 polymorphisms in Brazilians are similar to worldwide populations. Additionally, the BclI polymorphism ...

Objetivo : Este estudo avalia polimorfismos (SNPs) do NR3C1 na população brasileira, que possui origem étnica heterogênea. Materiais e métodos : SNPs do NR3C1 foram avaliados em brasileiros de ancestralidade caucasiana, africana ou japonesa (n = 380). Em um subgrupo (n = 40), os genótipos foram comparados à sensibilidade aos glicocorticoides (GC), previamente avaliada por cortisol plasmático (PF) e salivar (SF) após supressão com dexametasona (DEX), ensaio de afinidade do receptor ao GC (K d ) e inibição por DEX de 50% da proliferação de mononucleares estimulada por concanavalina-A (IC 50 ). Discriminação alélica de p.N363S (rs6195), p.ER22/23EK (rs6189-6190) e BclI (rs41423247) foi realizada por PCR em tempo real. Éxons 3 a 9 e transições éxon/íntron foram amplificados e sequenciados. Resultados : Frequências genotípicas (%) foram: rs6195 (n = 380; AA:96,6/AG:3,14/GG:0,26), rs6189-6190 (n = 264; GG:99,6/GA:0,4), rs41423247 (n = 264; CC:57,9/CG:34,1/GG:8,0), rs6188 (n = 155; GG:69,6/GT:25,7/TT:4,7), rs258751 (n = 150; CC:88,0/CT:10,7/TT:1,3), rs6196 (n = 176; TT:77,2/TC:20,4/CC:2,4), rs67300719 (n = 137; CC:99,3/CT:0,7), e rs72542757 (n = 137; CC:99,3/CG:0,7). Enquanto rs67300719 e rs72542757 foram exclusivos dos nipodescendentes, p.N363S e p.ER22/23EK estavam ausentes nesses indivíduos. p.ER22/23EK foi exclusivo dos descendentes de caucasianos. Equilíbrio de Hardy-Weinberg foi observado, exceto nos nipodescendentes para rs6188 e rs258751 e nos afrodescendentes para p.N363S. K d , IC 50 , PF ou SF basal ou após DEX foram semelhantes entre os genótipos. Entretanto, a dose média de DEX que suprimiu PF ou SF diferiu entre os genótipos BclI (P = 0,03), sendo maior nos carreadores GG (0,7 ± 0,2 mg) comparada aos GC (0,47 ± 0,2 mg) e CC (0,47 ± 0,1 mg). Conclusão : As ...

Expressão da proteína ligadora de cálcio S100 A7 (psoriasina) no carcinoma laríngeo / Expression of calcium binding protein S100 A7 (psoriasin) in laryngeal carcinoma

Muitos estudos relatam o aumento da expressão de S100 A7 (psoriasina) em lesões neoplásicas. Destacam-se trabalhos em carcinoma da mama, espinocelular da bexiga, pele e cavidade oral. Não foi demonstrada expressão da S100 A7 em câncer de laringe. OBJETIVO: Identificar a expressão da proteína ligadora de cálcio S100 A7 e sua correlação com carcinomas espinocelular da laringe. MATERIAL E MÉTODOS: Amostras de tecido neoplásico de 63 pacientes foram submetidos à imunohis toquímica com o anticorpo S110 A7. Os resultados foram classificados e comparados. RESULTADOS: O grupo bem diferenciado teve a maior pontuação de falha no tratamento. O grupo moderadamente diferenciado apresentou escores mais elevados do que o grupo pouco diferenciado. Pontuações mais altas predominaram nos estágios I e II no grupo moderadamente diferenciado, enquanto a distribuição do escore foi mais homogênea em estados avançados (III e IV). Em relação às falhas no tratamento, o grupo pontuação zero (04/03 complicações: 75%) diferiu significativamente da pontuação restante (13/59: 22%). CONCLUSÕES: A S100 A7 foi expressa em 93,7% dos casos de câncer de laringe, com maior positividade nos tumores mais diferenciados e taxa significativamente menor de falha no tratamento. A pontuação obtida não teve impacto sobre a sobrevivência.

Many studies have reported increased expression of S100 A7 (psoriasin) in neoplastic lesions. Among them are studies on breast carcinoma, bladder squamous cell carcinoma, skin tumors and oral cavity squamous cell carcinoma. The expression of S100 A7 has not been described for laryngeal cancer. OBJECTIVE: This study aims to identify the expression of the calcium-binding protein S100 A7 and its correlation with squamous cell carcinomas of the larynx. MATERIAL AND METHODS: Specimens from 63 patients were submitted to immunohistochemistry testing with antibody S100 A7. Results were classified and compared. RESULTS: The group with highly differentiated tumors had the highest treatment failure scores. Moderately differentiated tumors had higher treatment failure scores than poorly differentiated tumors. Higher scores were predominantly seen on stages I and II in moderately differentiated tumors, whereas score distribution was more homogeneous in advanced stage disease (III and IV). Regarding failure in treatment, the group scoring zero (3/4 complications: 75%) differed significantly from the remaining groups (13/59: 22%). CONCLUSIONS: S100 A7 marker was expressed in 93.7% of laryngeal cancer cases, with higher positive correlation rates in more differentiated tumors and significantly lower rates of treatment failure. Scores had no impact on survival rates.

Modern cancer epidemiological research: genetic polymorphisms and environment

A suscetibilidade individual ao câncer envolve fatores como mudanças na expressão dos oncogenes e genes supressores de tumores e, também, diferenças em genes específicos que regulam a ação de enzimas metabólicas e de reparo do DNA. Estudos epidemiológicos relacionando polimorfismos genéticos e câncer têm mostrado riscos relativos tênues. Pesquisas abordando simultaneamente a prevalência de polimorfismos genéticos e a exposição a fatores ambientais podem conduzir a resultados relevantes para a compreensão da etiologia do câncer e dos mecanismos da carcinogênese e, ainda, trazer novas contribuições sobre o prognóstico da doença. No presente artigo, discute-se a lógica da epidemiologia molecular na pesquisa em câncer, ressaltando-se o exame de polimorfismos genéticos nos estudos caso-controle e de coorte, bem como os fatores que podem introduzir vieses e confusão. Assim como na pesquisa epidemiológica clássica, na epidemiologia molecular é necessário avaliar aspectos relacionados à precisão e à acurácia na fase de planejamento do estudo.

Características hematológicas e perfil de expressão de antígenos mielóides de pacientes com leucemia promielocítica aguda: análise de fatores prognósticos para o desenvolvimento da síndrome do ácido retinóico / Hematological features and expression profile of myeloid antigens of acute promyelocytic leukemia patients: analysis of prognostic factors for development of the retinoic acid syndrome

OBJETIVO: A leucemia promielocítica aguda (LPA) apresenta uma boa resposta ao tratamento com o ácido all trans retinóico (ATRA). Entretanto, alguns pacientes desenvolvem uma complicação grave chamada síndrome do ácido retinóico (SAR). O objetivo deste estudo foi comparar as características hematológicas e imunofenotípicas de pacientes com LPA que desenvolveram a SAR com as daqueles que não a desenvolveram. MÉTODOS: Foram analisados retrospectivamente os prontuários, exames radiológicos, lâminas de esfregaço de sangue e medula óssea de 71 pacientes com LPA, dos quais a análise imunofenotípica havia sido realizada em 56 casos. Foram identificados oito casos de SAR que, do ponto de vista clínico, caracterizaram-se por insuficiência respiratória (n=8), insuficiência renal (n=2), febre (n=5), ganho ponderal (n=3), edema periférico (n=3) e derrame pleural (n=5). As seguintes variáveis foram comparadas entre pacientes com e sem SAR: dosagem de hemoglobina, contagens de leucócitos e plaquetas no sangue periférico, distribuição dos subtipos hipergranular e variante, percentagens de blastos CD33+, CD13+, CD117+ na medula óssea, intensidade e variação dos valores de fluorescência destes antígenos nas células leucêmicas, expressas através dos canais medianos (CMFs) e dos coeficientes de variação (CVs) de fluorescência, respectivamente. RESULTADOS: A incidência da SAR foi de 11,26 por cento e o tempo médio para seu desenvolvimento 11,5 dias do início do tratamento. Todos os pacientes apresentaram desconforto respiratório agudo, por vezes associado à febre, ganho de peso, edema e insuficiência renal. Os achados radiológicos mais comuns foram: opacidades em vidro fosco, derrame pleural, espessamento peribrônquico e aumento da trama vascular pulmonar. Nenhuma das variáveis laboratoriais analisadas correlacionou-se significativamente ao risco de desenvolvimento da SAR, entretanto as Odd Ratios para CMF para o CD117 > 30 ua e CV para o CD33 < 50 foram de 7,14 (P=0,08) e de 7,86 (P=0,06), respectivamente. CONCLUSAO: A incidência e as características da SAR neste grupo de pacientes brasileiros foi semelhante à descrita na literatura. Nenhum dos parâmetros estudados correlacionou-se significativamente a um maior risco de desenvolvimento desta complicação.

Molecular diseases: The role of genetic factors in venous thrombosis

As doenças multigênicas são aquelas em que o fenótipo clínico é resultante da interação de diferentes mutações em diversos genes. Embora o risco da ocorrência da doença determinado por cada defeito genético isoladamente possa ser baixo, a presença simultânea de várias mutações aumenta o risco da sua ocorrência. As doenças mutigênicas podem também ser vistas como consequentes à interação de uma coleção heterogênia de fatores genéticos e ambientais. O conceito de doença multigênica aplica-se a numerosas condições clínicas como o cancer, hipertensão, diabetes, dislepidemia, obesidade, suscebilidade a infecções, doenças auto-imunes, osteoporose, aterosclerose e tromboembolismo venoso. Como uma grande proporção dos pacientes com trombose venosa ou embolia pulmonar tem uma tendência hereditária a hipercoagulabilidade, o termo "trombofilia" foi introduzido para descrever a predisposição genética aumentada à trombose venosa. Numerosos fatores genéticos que têm uma relação bem estabelecida ou suspeita com trombofilia foram ou estão sendo identificados: Mutações dos genes de antitrombina, de proteína C, proteína S, fatores genéticos em casos individuais permite compreender a tendência hereditária ao tromboembolismo sob uma base mais objetiva e quantificável

Hemoglobinopathies and other hereditary hematological diseases in the brazilian population

The complex history and structure of the Brazilian population, to which contributed a large number of ethnic components that are in a state of increasing miscegenation, are reflected in the diversity, frequency and regional distribution of the more common hereditary diseases. It is interesting to observe that no gene mutation was inherited from the original Amerindian population, which is severely reduced today. Four important group of hereditary hematological diseases are represented in the Brazilian population: Sickle cell anemia and other hemoglobinopathies, the thalassemias, familial hypercholesterolemia and thrombophilia. Sickle cell anemia, hemoglobin C disease and thalassemias are heterogeneously distributed owing to the unevenly proportion of descendants of African blacks and European immigrants in the different regions of the country. The most frequent cause of familiar hypercholesterolemia is a mutation of Arab origin. The mutations that may represent risk factors for thrombophilia have a heterogenous ethnic distribution which may help to explain the differences in the prevalence of thrombotic diseases.

Heterogeneous ethnic distribution of the factor V leiden mutation

Inherited resistance to activated protein C caused by the factor V Leiden (FVL) mutation is the most common genetic cause of venous thrombosis yet described, being found in 20-60 per cent of patients with venous thrombophilia. A relationship between the FVL mutation and an increased predisposition to arterial thrombosis in young women was recently reported. We assessed the prevalence of the FVL mutation in 440 individuals (880 chromosomes) belonging to four different ethnic groups: Caucasians, African Blacks, Asians and Amerindians. PCR amplification followed by MnlI digestion was employed to define the genotype. The FVL mutation was found in a heterozygous state in four out of 152 Whites (2.6 per cent), one out of 151 Amerindians (0.6 per cent), and was absent among 97 African Blacks and 40 Asians. Our results confirm that FVL has a heterogeneous distribution in different human populations, a fact that may contribute to geographic and ethnic differences in the prevalence of thrombotic diseases. In addition, these data may be helpful in decisions regarding the usefulness of screening for the FVL mutation in subjects at risk for thrombosis.

Absence of the E2 allele of apolipoprotein in Amerindians

A determinaçäo da distribuiçäo do alelo ApoE em cinco tribos de índios sulamericanos revelou ausência do alelo ApoE2, acompanhada por freqüência alta do alelo ApoE3 e baixa do alelo ApoE4 na maioria das tribos, uma distribuiçäo previamente relatada apenas para os esquimós Inuit da Groenlândia.

Factor VIII gene polymorphisms in Amerindians from the Brazilian Amazon region

Determinamos as freqüências alélicas de polimorfismos de restriçäo ligados ao gene do fator VIII da coagulaçäo em 95 indígenas provenientes de cinco tribos da Amazônia: Wayampí, Wayana-Apalaí, Kayapó, Arára e Yanománi. Seis sítios polimórficos foram analisados: BclI (intron 18), HindIII (intron 19), XbaI A (intron 22), BglI (intron 25) e dois sítios extragênicos XbaI (XbaI B e XbaI C, localizados a 5' do gene). A distribuiçäo dos polimorfismos do gene do fator VIII em Ameríndios foi similar à observada em populaçöes asiáticas e caucasóides, mas diferiu claramente do padräo observado em negros. A distribuiçäo das freqüências alélicas dos polimorfismos intragênicos BclI, HindIII e XbaI näo diferiu significativamente entre as cinco tribos. Por outro lado, houve heterogeneidade das freqüências alélicas para os sítios BglI e XbaI B e XbaI C, indicando uma possível heterogeneidade entre as tribos ameríndias. Esses resultados se contrapöem à ausência de diversidade observada com a análise dos polimorfismos dos genes das globinas ß-símiles, mas concordam com nosso resultados recentes obtidos através de haplótipos de genes da globina alfa e de 6 VNTRs nas mesma populaçöes. Dessa forma, nossos resultados representam uma evidência adicional da heterogeneidade entre diferentes tribos ameríndias e reforçam a necessidade de se estudar um maior número de sistemas gênicos para uma melhor caracterizaçäo das interrelaçöes genéticas entre essas subpopulaçöes. Demonstra-se, também, que os polimorfismos associados ao gene do fator VIII podem representar uma ferramenta útil em estudos de genética populacional.

Anemias / Anemia

A anemia constitui um problema médico muito freqüente, cuja abordagem clínica requer o conhecimento da sequência de etapas da formaçao e destruiçao das hemácias, tanto do ponto de vista fisiológico como patológico. Nesta revisao, após a conceituaçao de anemia, sao discutidos seus mecanismos etiopatogênicos e manifestaçoes clínicas, finalizando com a análise dos dados de observaçao clínica necessários para o estabelecimento do diagnóstico preciso.

Molecular genetics and anthropology: Genes, races and diseases

Advances of molecular genetics which have helped to characterize the genetic features of the Brazilian population and the relationship between ethnicity and disease are summarized. We discuss our contributions to: a) DNA polymorphisms in Amazonian Indians; b) origin and heterogeneity of the sickle cell anemia gene; c) mutations of the LDL-receptor gene; d) mutations which cause hemophilias. The beta-globin gene haplotypes of Indians present a close similarity with Asian populations, which strengthens the argument for an Asiatic origin of the native populations of America. Sickle cell anemia mutation occurs with at least five different haplotypes, which originated in distinct geographic regions of Africa and Asia. The Bantu haplotype is the most frequent haplotype in Brazil, while the Benin haplotype predominates in the USA and Jamaica, as a consequence of different patterns of slave traffic to North and South Americas. This heterogeneity may be responsible for differences in the clinical behavior of the disease and other features among black populations of the Americas. In 50 per cent of families with familial hypercholesterolemia, the disease was caused by the Lebanese allele, a nonsense mutation of the LDL-r gene, always observed in families of Arab origin. Thus, this mutation is probably the most common cause of familial hypercholesterolemia in Brazil. In contrast, the mutations responsible for hemophilias A and B are heterogeneous, and show no particular association with racial groups. Recently, five hemophilia mutations were characterized in our laboratory, including previously unreported deletions and point mutations of coagulation factors VIII and IX.

The frequency of blood-born viral infections in a population of multitransfused Brazilian patients

The frequency of viral markers for hepatitis B (HBV) and C (HCV), human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) and human T-lymphotropic virus-1 (HTLV-1) was evaluated in 32 Brazilian beta-thalassemia multitransfused patients. Additionally the serum concentrations of ferritin and alanine aspartate transaminase (ALAT) were determined. The results show a high prevalence of markers of infection by HBV (25.0) and HCV (46.8) and a low prevalence of markers for HIV-1 and HTLV-1. No correlations were demonstrated between the presence of the hepatitis markers and the number of units transfused or the serum concentrations of ferritin and ALAT.

Detection of hemophilia A carriers by DNA analysis. Comparison with coagulation tests

Utilizamos métodos de análise de DNA para detecçäo de portadoras de hemofilia A em 23 possíveis portadoras oriundas de 8 famílias brasileiras näo-relacionadas. Em duas famílias, a investigaçäo de portadoras foi realizada através da identificaçäo prévia das anormalidades do gene do fator VIII (FVIII). Foram caracterizadas uma grande deleçäo envolvendo os exons 16-26 e uma mutaçäo do sítio TaqI do exon 24. Nos casos restantes a análise familiar foi realizada através do estudo de seis polimorfismos associados ao gene do FVIII: BclI, HindIII, XbaI, BgII, MspI e o sistema extragênico TaqI-St14. Os resultados obtidos por métodos bioquímicos clássicos (análise do pedigree associada a resultados de dosagens de fatores de coagulaçäo) mostraram-se imprecisos em 38 per cent dos casos, quando comparados com os resultados obtidos pelos métodos de análise gênica. Adicionalmente, foram determinadas as frequências alélicas de cada um dos sítios polimórficos em uma amostra de 32 indivíduos brasileiros näo-realcionados. As frequêncis dos alelos dos sítios intragênicos näo diferiram significativamente das frequências observadas em outras populaçöes caucasóides anteriormente estudadas. Os resultados aqui apresentados säo úteis para a definiçäo da melhor estratégia para a detecçäo de portadoras de hemofilia A na populaçäo brasileira.

Inconsistência metodológica no ensino da anamnese nas escolas de medicina

Säo analisados alguns aspectos característicos do processo de obtençäo da anamnese, do exame físico e formulaçäo de hipóteses diagnósticas: predominância de dados qualitativos, ausência de hipótese prévia a ser testada, envolvimento direto do observador (médico) com a fonte de dados (doente), formulaçäo e rejeiçäo de hipóteses e modificaçäo do doente durante o processo. Em vista disto, a investigaçäo diagnóstico guarda grande distância da metodología científica quantitativa, moldada no positivismo lógico, que domina toda a investigaçäo e educaçäo médica